目的蛋白条带很明显，但是内参出不来?
2023-09-11 阅读 38
如果你的目的蛋白条带在凝胶上很明显，但是内参（参照蛋白）的条带却无法出现，可能有以下几个原因：
1. 内参蛋白的浓度过低：内参蛋白的浓度应该与目的蛋白相当，以便在凝胶上形成明显的条带。如果内参蛋白的浓度太低，它的条带可能会非常弱或无法被检测到。尝试增加内参蛋白的加载量或者使用更敏感的检测方法。
2. 内参蛋白的选择不合适：选择一个合适的内参蛋白对于准确的定量非常重要。确保选择的内参蛋白在样品中的表达量是相对稳定的，并且它的分子量与目的蛋白不相似，以免产生重叠的条带。
3. 凝胶电泳条件不正确：确保凝胶电泳的条件（如电压、运行时间、凝胶浓度等）是正确的。不正确的电泳条件可能导致蛋白条带模糊或扩散，使得内参蛋白的条带无法清晰显示。
4. 蛋白样品的处理不当：在样品制备和加载过程中，如果没有进行适当的处理，如蛋白的还原和变性，可能会导致内参蛋白无法被检测到。确保样品处理步骤正确并且充分。
如果以上方法仍然无法解决问题，建议咨询实验室的同事或专业人士，以获取更具体的建议和帮助。
更新于 2023年09月11日
