融合蛋白的His标签前，蛋白最后一个氨基酸也被翻译成His怎么办？能被6✖️His一抗识别镍柱纯化吗?
2023-05-21 阅读 56
如果融合蛋白的His标签前，蛋白最后一个氨基酸也被翻译成His，那么在镍柱纯化时会出现两个His标签，这可能会导致纯化效率降低，因为6xHis一抗可能会识别不到目标蛋白。
为了避免这种情况，可以在设计融合蛋白时，在His标签的C端添加一个小的附加序列，以确保His标签是唯一的。此外，也可以使用其他亲和层析柱，如Glutathione Sepharose柱或Protein A Sepharose柱等进行纯化。
如果无法更改融合蛋白的设计，可以尝试使用其他的抗体，如Anti-His Antibody或Anti-Myc Antibody等。
更新于 2023年05月25日
