扩基因时未加模板，但是pcr有带怎么回事？
2023-12-30 阅读 105
在扩增基因时，通常需要使用引物（primers）来选择性地扩增目标基因序列。引物是一段DNA序列，它与目标基因的两个侧翼序列相互补。在PCR反应中，引物与DNA模板结合，并通过DNA聚合酶的活性在目标基因的两侧合成新的DNA链。
如果在扩增基因时未加入模板，但是PCR反应中仍然出现了扩增产物，可能有以下几种可能的解释：
1. 污染：PCR反应体系中可能存在外源性DNA污染，例如来自实验室环境、试剂或之前的PCR产物。这些污染物可以作为模板参与扩增反应。
2. 低浓度模板：即使未加入模板，也有可能在样品中存在极低浓度的目标基因DNA。这可能是由于实验操作中的交叉污染或目标基因DNA在样品中的自然存在。
3. 引物二聚体：引物在PCR反应中可能会形成二聚体或多聚体，这些二聚体或多聚体可能作为模板参与扩增反应。
4. 引物自身扩增：引物序列中可能存在自身互补的片段，这些片段可以相互结合并作为模板参与扩增反应。
如果在PCR反应中出现了非预期的扩增产物，建议进行进一步的实验控制，例如进行阴性对照实验，使用无模板的PCR反应，以检测是否存在污染。此外，可以尝试优化PCR反应条件，包括引物浓度、温度和扩增周期数，以减少非特异性扩增。
更新于 2023年12月30日
