你知道引物硫代修饰为什么要在末端修饰2-5个碱基吗?
2023-12-03 阅读 56
引物硫代修饰是一种在引物末端添加硫代基团的修饰方法。这种修饰的目的是增强引物与靶序列的亲和性和稳定性,以提高PCR、RT-PCR等核酸扩增技术的特异性和灵敏度。
在末端修饰2-5个碱基的原因主要有以下几点:
1. 增加亲和性:硫代修饰可以通过与靶序列中的亮氨酸残基形成硫键,增加引物与靶序列的结合力。修饰的碱基数目较多,可以提供更多的硫键形成位点,从而增加引物与靶序列的亲和性。
2. 提高稳定性:硫代基团的引入可以增加引物的稳定性,使其不容易被核酸酶降解。修饰的碱基数目较多,可以提供更多的硫键形成位点,增加引物的稳定性,从而减少引物的降解和失活。
3. 避免非特异性扩增:引物的末端修饰可以减少非特异性扩增的发生。修饰的碱基数目较多,可以限制引物与非特异靶序列的结合,提高特异性扩增的选择性。
总之,引物硫代修饰在末端修饰2-5个碱基可以增强引物与靶序列的亲和性和稳定性,提高PCR、RT-PCR等核酸扩增技术的特异性和灵敏度。
更新于 2023年12月03日