最近在做双荧光素酶报告基因。为啥转染pGLS-Basic空载载体,上面没有启动子。但为啥也会发光呢?
2023-11-15 阅读 46
转染pGLS-Basic空载载体时,没有启动子意味着没有特定的启动子序列来驱动报告基因的表达。然而,双荧光素酶(Dual-Luciferase)报告基因系统中的荧光素酶(Luciferase)基因是由强大的转录启动子(例如CMV启动子)驱动的,该启动子通常与负载载体中的报告基因系统相结合。因此,即使没有外部启动子,荧光素酶基因仍然可以通过内部启动子进行表达。
此外,空载载体本身可能包含一些基本的转录调控元件,如转录因子结合位点或增强子,这些元件可以与内部启动子相互作用,从而促进基因的表达。因此,即使没有外部启动子,荧光素酶基因仍然可以在转染后发光。
需要注意的是,由于没有外部启动子的参与,转染pGLS-Basic空载载体的报告基因表达水平可能较低。如果需要更高的报告基因表达水平,可以考虑使用带有特定启动子的载体。
更新于 2023年11月15日