低pH的蛋白样品，使用SDS-PAGE方法电泳测纯度时，如何前处理？
2023-08-21 阅读 38
在处理低pH的蛋白样品时，可以采取以下步骤进行前处理：
1. 样品溶解：将蛋白样品溶解在合适的缓冲液中，pH值应低于蛋白的等电点，以防止蛋白在电泳过程中发生聚集或沉淀。
2. 加入SDS：向蛋白样品中加入适量的SDS（十二烷基硫酸钠）以使蛋白质变性，并使其带有负电荷，便于在电场中迁移。
3. 加入还原剂：加入还原剂（如二巯基乙醇）以断裂蛋白质之间的二硫键，使其成为线性形式，有利于电泳迁移。
4. 加热：将样品加热至较高温度（通常为95°C）进行蛋白质变性，以保证样品中的蛋白质完全解聚。
5. 负载缓冲液：将样品与负载缓冲液混合，以提供足够的离子强度和pH值，使蛋白能够在凝胶中迁移。
完成这些前处理步骤后，可以将样品加载到SDS-PAGE凝胶中进行电泳测定纯度。
更新于 2023年08月21日
