请问基因编辑设计的donor载体,同源臂之间加个内含子是什么原因?为什么又把puro基因放到内含子里?

2023-08-17 阅读 55

在基因编辑设计中,同源臂是用来实现特定基因组的插入、替换或删除的DNA片段。内含子是一种DNA序列,存在于基因的转录过程中,它们在转录后会被剪切掉。同源臂之间加入内含子的主要原因是为了增加基因编辑的效率和准确性。

将puro基因放到内含子中的目的是利用puro基因的选择性毒性。puro基因编码了一种能够使细胞对抗抗生素puromycin的蛋白质。通过将puro基因放入内含子中,当基因编辑成功后,内含子会被剪切掉,同时也会剪切掉puro基因,从而使得细胞对puromycin敏感。这样一来,只有成功进行基因编辑的细胞才能存活下来,从而实现对编辑目标的选择性筛选。

更新于 2023年08月17日