做荧光定量pcr,想测定目的基因表达量,模板是用RNA反转录成cDNA,还是能直接用基因组DNA?
2023-08-14 阅读 124
荧光定量PCR(qPCR)是一种测定目的基因表达量的常用方法。在qPCR中,可以使用RNA反转录成的cDNA作为模板,也可以使用基因组DNA作为模板。
使用RNA反转录成cDNA作为模板时,可以通过逆转录反应将RNA转录成cDNA,然后使用cDNA作为qPCR的模板。这种方法适用于研究基因的转录水平,即RNA的表达量。
使用基因组DNA作为模板时,可以直接将DNA作为qPCR的模板。这种方法适用于研究基因的拷贝数,即DNA的含量。
选择使用RNA反转录成cDNA还是基因组DNA作为模板,取决于你想要研究的是基因的转录水平还是拷贝数。如果你关注基因的转录水平,那么使用RNA反转录成cDNA作为模板更合适;如果你关注基因的拷贝数,那么使用基因组DNA作为模板更合适。
需要注意的是,在使用RNA反转录成cDNA作为模板时,需要进行反转录反应以合成cDNA。而使用基因组DNA作为模板时,不需要进行反转录反应。
更新于 2023年08月14日