配置一定范围的MPN菌液需要以下步骤:
准备MPN菌液的培养基:选择适合MPN菌液生长的培养基,如大肠杆菌的LB培养基。
准备菌种:选择合适的MPN菌株,从冻存物或已有的培养物中提取菌种。
制备初级培养物:将菌种接种到含有适量培养基的试管或烧杯中,培养一段时间,通常为16-24小时,以使菌种充分繁殖。
确定MPN菌液的浓度范围:根据实验需要,确定所需MPN菌液的浓度范围。例如,10^2-10^6 CFU/mL。
稀释初级培养物:根据所需浓度范围,逐渐稀释初级培养物。可以使用一系列稀释液管或试管进行稀释,每次稀释后将一部分转移到下一个管中。
均匀混合:在每次稀释后,用移液器或振荡器轻轻混合,以确保菌液均匀。
取样和菌液计数:从最后一次稀释液管中取样,使用适当的方法计数菌落形成单位(CFU)。
调整菌液浓度:根据实际计数结果,计算并调整菌液的浓度,以达到所需的范围。
检测菌液浓度:使用适当的方法(如平板计数法、光密度测定法)检测菌液的浓度,确保其在所需范围内。
存储和使用:将调整后的MPN菌液分装到合适的容器中,标明菌株和浓度,并储存于适当的温度下,以便后续实验使用。
请注意,在进行MPN菌液的配置过程中,应遵循严格的无菌操作,以确保菌液的纯度和可靠性。