如何对小鼠全脑组织冰冻切片进行显微镜观察?
2023-05-11 阅读 31
对小鼠全脑组织进行冰冻切片后,可以使用荧光显微镜或共聚焦显微镜进行观察。
具体步骤如下:
1. 将小鼠的大脑取出并快速冷冻在液氮中。
2. 使用切片机或者手工切片器将大脑切成薄片,厚度通常为30-50微米。
3. 将切片放在载玻片上,用PBS或者其他缓冲液洗涤。
4. 使用荧光染料或者抗体标记目标蛋白,如神经元标记剂(NeuN)等。
5. 加盖玻片并在显微镜下观察。
6. 如果需要进行三维成像,可以使用共聚焦显微镜进行观察。
需要注意的是,在切片过程中要保持切片的温度低于-20℃,以避免组织变性。同时,在染色过程中也要注意避免染色剂或抗体的过度使用,以避免对组织结构的破坏。
更新于 2023年05月14日