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问一下各位生物大佬，上下引物tm值不一样时该如何选取退火温度?
2024-12-04 阅读 8
在PCR扩增实验中，如果上下引物的Tm值不一样，通常建议选择一个适中的退火温度，使得两个引物的Tm值都在该温度附近。一般来说，可以选择两个引物Tm值的平均值作为退火温度，或者选择两个Tm值中较低的那个作为退火温度。这样可以确保两个引物在相同的温度下都能够有效结合到模板DNA上，从而提高PCR扩增的效率和特异性。另外，还可以通过温度梯度PCR实验来确定最佳的退火温度。
更新于 2024年12月08日
