怎么验证质粒有没有降解啊，因为经常反复冻融，然后转染效果差了些，不知道是不是质粒降解了？
2023-04-28 阅读 50
质粒降解会导致转染效果下降，验证质粒是否降解可以通过以下方法：
1. 酶切：将质粒进行限制性酶切，然后进行凝胶电泳检测，如果出现异常条带或者质粒带消失，则说明质粒可能已经降解。
2. 质粒提取：使用质粒提取试剂盒提取质粒，然后进行凝胶电泳检测，如果出现异常条带或者质粒带消失，则说明质粒可能已经降解。
3. 测序：将质粒进行测序，如果测序结果与预期不符，或者出现插入、缺失、错义等异常情况，则说明质粒可能已经降解。
4. 转染对照组：在转染时设置对照组，如果对照组的转染效果正常，而实验组的转染效果下降，则说明质粒可能已经降解。
需要注意的是，反复冻融会导致质粒降解，因此在使用质粒时应尽量避免反复冻融。
更新于 2023年05月05日
