蛋白磷酸化检测方法有哪些?
2023-11-27 阅读 38
蛋白磷酸化是细胞信号传导中重要的调控机制之一。以下是常用的蛋白磷酸化检测方法:
1. 免疫印迹(Western blotting):通过使用特异性抗体来检测蛋白磷酸化状态。可以使用磷酸化特异性抗体或磷酸化特异性蛋白结合域(如PTMScan等)。
2. 免疫组化(Immunohistochemistry):通过使用特异性抗体和染色技术来检测磷酸化蛋白在组织或细胞中的分布和定位。
3. 免疫共沉淀(Immunoprecipitation):通过使用特异性抗体将磷酸化蛋白与其相互作用的分子一起沉淀下来,然后使用Western blotting等方法检测磷酸化状态。
4. 质谱(Mass spectrometry):通过质谱技术分析蛋白质样品中的磷酸化位点和磷酸化水平。
5. 蛋白芯片(Protein microarray):使用包含多个蛋白质的芯片来检测磷酸化蛋白与其他蛋白质的相互作用。
6. 免疫流式细胞术(Flow cytometry):通过使用特异性抗体和流式细胞仪来检测细胞表面或细胞内的磷酸化蛋白。
这些方法可以根据实验需求和研究目的选择合适的技术。
更新于 2023年11月27日