过完葡聚糖G100后跑sds发现蛋白没有被分开,咋回事呀大佬们?
2023-11-24 阅读 48
葡聚糖G100是一种高分子聚合物,在SDS-PAGE分析中可能会影响蛋白质的迁移和分离。葡聚糖G100可能会形成网状结构,阻碍蛋白质的迁移,导致蛋白质无法被有效地分开。
要解决这个问题,你可以尝试以下方法:
1. 增加SDS的浓度:增加SDS的浓度可以提高其对蛋白质的包裹能力,有助于蛋白质的解离和分离。
2. 增加还原剂:添加还原剂(如β-巯基乙醇)可以破坏蛋白质之间的二硫键,有助于蛋白质的解离和分离。
3. 增加离子强度:增加离子强度(如添加较高浓度的NaCl)可以降低葡聚糖G100的影响,促进蛋白质的迁移和分离。
4. 尝试其他凝胶体系:如果以上方法无效,可以考虑尝试其他凝胶体系,如聚丙烯酰胺凝胶(polyacrylamide gel)或聚丙烯酰胺凝胶(agarose gel)。
需要注意的是,具体的操作步骤和条件可能因实验条件和蛋白质的特性而有所不同,建议根据具体情况进行优化和调整。
更新于 2023年11月24日