做遗传转化时，用农杆菌侵染，筛选之后，清洗转到新的筛选培养基，依旧污染严重，想问一下大家怎么解决的？
2023-08-31 阅读 29
遗传转化实验中出现污染问题是很常见的情况，以下是一些可能的解决方法：
1. 提高消毒条件：确保实验室和操作台面的清洁，并使用消毒剂彻底清洗培养器具和培养基。
2. 选择适当的抗生素：在转化培养基中添加适当浓度的抗生素，以抑制非转化的细菌的生长。同时，确保抗生素对目标菌株有效。
3. 优化培养条件：调整培养基的pH值、温度和营养成分等因素，以提高目标菌株的生长速度和适应性，从而抑制其他污染菌株的生长。
4. 使用选择标记：在转化过程中，将目标基因与选择标记基因连接，通过筛选能够抗拒抗生素或其他化合物的转化株。
5. 进行连续筛选：将转化后的细菌进行连续筛选，通过多次传代培养来降低污染菌株的数量。
6. 进行单菌分离：将转化后的细菌进行单菌分离，通过在固体培养基上进行分离和筛选，获得纯净的转化株。
7. 增加抗菌剂浓度：在转化培养基中增加抗菌剂的浓度，以抑制污染菌株的生长。
8. 改变转化方法：尝试使用不同的遗传转化方法，如电穿孔法、基因枪法等，以提高转化效率并减少污染。
请注意，每个实验室和菌株可能存在不同的情况，因此解决污染问题的最佳方法可能因实验条件而异。建议根据具体情况进行实验优化和改进。
更新于 2023年08月31日
