指导RNA是怎么让mRNA形成缺口的？
2023-08-24 阅读 49
指导RNA（guide RNA）是一种在CRISPR-Cas系统中使用的分子，用于指导Cas蛋白酶切割靶向的DNA或RNA序列。在CRISPR-Cas9系统中，指导RNA由两个部分组成：crRNA（CRISPR RNA）和tracrRNA（trans-activating CRISPR RNA）。
crRNA是由原始的CRISPR序列转录和加工而来的，其中包含与目标DNA或RNA序列互补的片段。tracrRNA是与crRNA结合形成双链结构的RNA分子。在Cas9蛋白酶的作用下，指导RNA与Cas9形成复合物，通过互补配对与目标DNA或RNA序列结合。
一旦指导RNA与目标序列结合，Cas9蛋白酶的核酸内切酶活性就会被激活。Cas9蛋白酶会切割目标序列，导致DNA或RNA链断裂，从而形成缺口。这个缺口可以被细胞修复机制利用，例如非同源末端连接（NHEJ）或同源重组修复（HDR），从而引发基因组编辑、基因敲除或基因插入等遗传改造。
需要注意的是，指导RNA的设计和选择对于CRISPR-Cas系统的有效性和特异性非常重要。正确选择目标序列和设计合适的指导RNA可以确保高效且准确地实现基因组编辑。
更新于 2023年08月24日
