THP-1诱导巨噬细胞M2后如何消化?
2023-06-26 阅读 34
一种常用的方法是使用酶消化。在THP-1细胞诱导为M2巨噬细胞后,可以使用酶如胰蛋白酶或胰酶来消化细胞。具体步骤如下:
1. 将培养皿中的M2巨噬细胞用PBS洗涤一次,以去除培养基和细胞碎片。
2. 向培养皿中加入足够的胰蛋白酶或胰酶溶液,覆盖细胞层。
3. 将培养皿放置在37°C恒温培养箱中,进行消化。消化时间可以根据需要进行调整,一般为10-30分钟。
4. 定时观察细胞的消化情况。当细胞开始分离并变得圆滑时,说明消化已经进行到位。
5. 加入足够的培养基来停止消化作用,并用离心将细胞沉淀下来。
6. 弃上清液,用PBS洗涤细胞沉淀,以去除酶和细胞碎片。
7. 用所需的方法继续处理消化后的细胞,如细胞培养、RNA/DNA提取、蛋白质提取等。
需要注意的是,在消化过程中要避免过度消化,以免影响细胞的功能和形态。因此,消化时间和酶的浓度需要根据实验需要进行优化。
更新于 2023年06月29日