如何建立FXR基因敲除小鼠模型?
2023-05-28 阅读 38
FXR基因敲除小鼠模型是通过基因编辑技术实现的。下面是一些可能的步骤:
1.设计sgRNA:使用CRISPR/Cas9技术,设计一个或多个sgRNA,以靶向FXR基因的特定区域。
2.合成sgRNA:将sgRNA序列合成,并与Cas9蛋白质结合。
3.转染:将sgRNA/Cas9复合物转染到小鼠胚胎干细胞中。
4.筛选:筛选出FXR基因敲除的干细胞克隆,并进行验证。
5.注射:将FXR基因敲除的干细胞克隆注射到小鼠的光照囊中,使其发育成小鼠胚胎。
6.移植:将FXR基因敲除小鼠胚胎移植到母鼠子宫内,使其发育成FXR基因敲除小鼠。
7.鉴定:通过PCR、Western blot、免疫组化等方法,鉴定FXR基因敲除小鼠是否成功。
需要注意的是,FXR基因敲除小鼠模型的建立需要专业的实验室和技术支持,同时也需要遵守相关的伦理和法律规定。
更新于 2023年05月29日