cdna条带弥散?为什么前三次CDNA进行PCR扩增还正常条带，之后跑三次就弥散条带？
2024-01-15 阅读 29
cDNA条带弥散可能是由于PCR反应中出现了一些问题。在前三次PCR扩增中正常出现条带，而之后出现条带弥散可能有几种可能的原因：
1. 反应条件变化：可能是PCR反应的条件在前三次和之后有所变化，比如温度、引物浓度、Mg2+浓度等因素的变化可能导致PCR反应的特异性降低，从而出现条带弥散。
2. 污染：可能在PCR反应中引入了外源DNA污染，比如细菌DNA、RNA等，这些污染物会干扰PCR反应，导致条带弥散。
3. 反应体系问题：可能是cDNA模板的质量或纯度不够好，或者PCR反应体系中其他组分的质量问题，这些因素都可能导致PCR反应的不稳定性，出现条带弥散。
为了解决这个问题，你可以尝试优化PCR反应条件，确保反应体系的纯度和质量，以及注意避免污染。另外，也可以尝试使用新鲜制备的cDNA模板进行PCR反应，以确保实验的可重复性和准确性。
更新于 2024年04月10日
